银杏外种皮多糖的免疫活性研究

目的研究脱蛋白和未脱蛋白银杏外种皮粗多糖（GBEP）对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用。方法采用药物方法建立免疫抑制小鼠动物模型，利用腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、血清溶血素抗体生成实验及脏器系数的变化，研究银杏外种皮粗多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果银杏外种皮粗多糖可增强免疫抑制小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素抗体水平以及能对抗环磷酰胺引起的脾脏萎缩。结论银杏外种皮粗多糖具有增强小鼠免疫功能的作用，脱蛋白粗多糖的免疫活性稍好于未脱蛋白多糖。     

鸢尾中鸢尾酮的鉴定及含量测定

目的 建立鸢尾中鸢尾酮的鉴定和分析方法。方法 采用气相色谱-质谱法鉴定了鸢尾酮的3种异构体，并采用气相色谱法测定了鸢尾浸膏中鸢尾酮的含量。结果 根据质谱裂解规律鉴定了3种鸢尾酮的异构体：α-、β-、γ-鸢尾酮，并且鸢尾浸膏中主要含γ-鸢尾酮。两批鸢尾中鸢尾酮的质量分数分别为687、238μg/g(n=6)，质量分数差异较大。结论 采用气相色谱一质谱法和气相色谱法分析鸢尾中鸢尾酮，方法高效、准确，分析时间适中。     

15种生药提取物抑制痤疮致病菌的活性筛选

目的 :对 15种生药乙醇提取物的体外抑制痤疮致病菌活性进行敏感性测试。方法 :采用最大浓度抑菌试验和最低抑菌浓度 (MIC)比较其抑菌效果。结果 :丁香生药挥发油对痤疮致病菌痤疮短棒菌苗 (P .acne)、金黄色葡萄球菌 (S .aureus)、表皮葡萄球菌 (S .epidermidis)均有强烈的抑制作用 ,厚朴、艾叶油、金银花、蒲公英等有中等程度的抑菌作用。结论 :丁香酚的抑菌效果在所试药物中最好。     

黄花乌头体细胞胚胎发生及其植株再生

目的 对不同植物激素及其配比对黄花乌头体细胞胚胎诱导及植株再生进行研究，为药用植物黄花乌头的资源开发提供理论依据。方法 以黄花乌头的茎、叶、胚轴、胚根和子叶为外植体考察不同植物激素对黄花乌头愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果 外植体接种于MS 2，4-D 1mg／L 6-BA 0．5mg／L的培养基上愈伤组织诱导率最高，愈伤组织在MS 2，4-D 0．2rng／L 6-．BA 0．5mg／L的培养基上连续继代几次后，分化出淡绿色具有圆锥状或原球状突起的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织能够在MS 6-BA2 mg／L的培养基上形成不定芽，该芽能够在MS＋IBA 0．5mg／L的培养基上生根．形成完整的再生植株。结论 利用体细胞胚胎发生技术可以成功地得到再生植株，从而为濒危植物黄花乌头的资源开发和保护提供新途径。     

基于OSC／PLS的茶叶中EGCG含量的近红外光谱法测定

采用正交信号校正法(OSC)对茶叶的近红外光谱进行预处理,并结合偏最小二乘法(PLS)建立表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)含量的预测模型.PLS校正模型采纳的最佳因子数会随着OSC因子的增加而逐渐减少以达到简化模型的效果.试验以预测残差平方和(PRESS)来评价模型的整体性能,当滤除前6个OSC因子时为最佳,此时校正模型采纳的PLS因子数为5,校正肘的相关系数r2和校正标准偏差SEC分别为0.955 90和0.38279,预测时的相关系数,和预测标准偏差SEP分别为0.936 61和0.444 13.研究结果表明,应用近红外光谱法结合0SC/PLS可以快速准确地测定茶叶中EGCG的含量.     

铁过载通过激动IL-11信号促进肾衰竭小鼠的心肌纤维化

目的 探讨铁过载能否通过激动白细胞介素-11(interleukin-11,IL-11)信号促进肾衰竭小鼠的心肌纤维化。方法 将C57小鼠随机分成5组,每组15只,即假手术(Sham)组、手术(CRF)组、铁过载(CRF+Fe)组、IL-11抑制(CRF+Fe+AAV9-IL-11-RNAi)组和IL-11激动(CRF+ Fe+ AAV9-IL-11-RNAi+rmIL-11)组。HE染色观察心肌损伤情况,Masson染色观察胶原纤维面积,普鲁士蓝染色观察铁沉积,ROS染色、MDA、SOD试剂盒检测氧化应激水平,免疫荧光、Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)表达情况及其与IL-11的相关性。结果 手术组小鼠较对照组血清肌酐(P<0.01)、尿素(P<0.001)水平增加,铁过载组心肌组织中见铁沉积增加。铁过载组较手术组α-SMA、vimentin、IL-11蛋白表达均明显升高(P<0.05),IL-11抑制组较铁过载组表达减少(P<0.05),而IL-11激动组较IL-11抑制组表达增多(P<0.05)。Masson染色示IL-11抑制组中蓝色胶原纤维较铁过载组明显减少,而IL-11激动组较抑制组明显增多。铁过载组较手术组小鼠氧化应激增加,而IL-11抑制组较铁过载组减少,IL-11激动组较IL-11抑制组增多。结论 铁过载可以通过激动IL-11信号促进肾衰竭小鼠的心肌纤维化。     

LncRNA ABHD11-AS1在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其机制

［摘要］目的： 探讨长链非编码RNA(long non coding RNA,lncRNA)α/β 水解酶结构域蛋白11的反义链1(α/β hydrolase domain containing protein 11 antisense strand 1,ABHD11 AS1)在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其潜在机制。方法: 通过GEPIA平台分析ABHD11 AS1在胰腺癌中的表达和患者预后。采用荧光实时定量PCR(qRT PCR)检测人胰腺癌PANC1、MIApaca 2和PaTu8988细胞中ABHD11 AS1表达,CCK8法计算Erastin半数抑制浓度(IC50)。在PANC1细胞中过表达ABHD11 AS1,分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1 ABHD11 AS1质粒;在PaTu8988细胞中干扰ABHD11 AS1表达,分别转染siControl、siRNA1、siRNA2,qRT PCR检测转染效率,分别予以对照(0 μmol/L Erastin)、Erastin(IC50浓度)处理,CCK8法检测细胞活性,ELISA法检测丙二醛和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量;另在pcDNA3-1-ABHD11-AS1和siRNA1组加入Erastin的同时加入铁死亡挽救剂Ferrostatin 1,坏死挽救剂Necrostatin-1或凋亡挽救剂Z-VAD-FMK,CCK8法检测细胞活性;免疫印迹法检测5组胰腺癌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)以及磷酸化mTOR(p-mTOR)表达水平。结果: 胰腺癌组织中ABHD11-AS1表达水平明显高于癌旁组织,高表达ABHD11-AS1组患者预后较差(P<0.05)。ABHD11-AS1相对表达量由低到高依次是人胰腺癌PANC1、MIApaca 2和PaTu8988细胞,Erasin IC50趋势与ABHD11 AS1表达量相同,依次是2.245、11.760、17.120 μmol/L。与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1 ABHD11 AS1组细胞活性及GSH含量明显增高,而丙二醛含量明显降低(P<0.05);与siControl组相比,siRNA1组和siRNA2组细胞活性及GSH含量明显降低,丙二醛含量明显增高(P均<0.05)。仅Ferrostatin-1可以挽救pcDNA3.1-ABHD11 AS1和siRNA1组细胞活性(P<0.05)。过表达ABHD11 AS1可促进mTOR活化,增强GPX4表达(P<0.05);而干扰ABHD11 AS1则相反。结论: LncRNA ABHD11 AS1可通过活化mTOR促进GPX4表达,从而促进胰腺癌细胞铁死亡抵抗。     

基于太赫兹时域光谱技术的名贵动物药材龟甲的真伪品鉴别

目的： 建立一种利用太赫兹时域光谱和多种化学计量学方法鉴别龟甲真伪的新方法。方法： 选用正品乌龟和伪品红耳彩龟的腹甲进行实验,先用经典的性状鉴别、显微鉴别方法比较两种样品的典型性状特征,后利用太赫兹时域光谱仪测得样品的光谱信息,对样品谱图进行平滑处理和基线校准,并运用化学计量方法进行数据分析以区分正品和伪品龟甲。结果： 性状鉴别结果显示完整正、伪品龟甲样品仅有细微差异,且其碎片或粉末基本无差异;显微鉴别未在两种样品中发现明显的特征差异性结构;两种样品的太赫兹时域光谱曲线图经快速傅里叶变换滤波器平滑滤波处理、正交偏最小二乘法判别分析处理后呈现显著差异。结论： 利用太赫兹时域光谱技术结合正交偏最小二乘法判别分析可以实现龟甲真伪品的精准鉴别。     

基于多生理信号的情绪初步识别

以生理信号分析为主,表情行为观察和情绪主观感受评价为辅,对多名被试的情绪进行识别.60名大学女生接受恐惧-快乐-轻松的情绪诱发,有效数据55名,对应每个情绪片段,根据信号标记以及GSR微分,截取1min的生理信号进行处理和分析,应用SPSS对各生理参数进行情绪的单因素方差分析,然后采用逐步多类判别法,提取特征参数以识别情绪.结果表明HR、HRV、R波、T波各生理参数对情绪较敏感;提取出HFP,HR max,PNN50,LF/HF,Ratio,LFP,Mean NN 7个特征参数,构建情绪判别函数Fuction1,Fuction2和Z1、Z2,Z3;轻松的判别正确率为88.0%,快乐的为92.0%,恐惧的为80.0%,总体判别正确率为86.7%.以生理信号分析为主,辅助表情行为观察和情绪主观感受报告,是一种有效的情绪识别方法,所得数据客观、准确,提高了情绪识别率.     

小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。